1. 是否粘稠？导致粘稠的原因：核酸片段多，影响病毒吸附，最终导致病毒回收差；2. 处理前，荧光显微镜下观察GFP所占百分比，细胞状态好的话，GFP会在细胞内；3. 核酸酶处理后，样品保留5 uL-10 uL； 4.洗脱后的4 mL液体，测OD280的值，可以粗略的估算病毒的含量。

是的，病毒上清最后收集在500 uL里面；根据下游实验安排交换缓冲液，可以用生理盐水或者任意需要的缓冲液。

我们的RV mini Column不吸附质粒DNA。关于检测的3种方法，第一，PCR在变性步骤时，已整合到病毒基因组上的片段会因为加热病毒破裂释放出来；第二，逆转录病毒一般是RNA病毒，多具有逆转录酶，所以即使没有人为的反转录步骤，自行反转录；建议：第7步，最后一步，将样品加入至centrifugal filter，3000 rpm，4度离心10 min，剩余500 uL，加入PBS3.5 mL，3000rpm在4度离心10 min。可以用PBS洗涤2-3遍，病毒不会损耗，但有利于去除核酸片段。一般而言，病毒纯化之后不会去检测是否含有质粒，不知道客户下游实验做什么需要这个要求，目前国内外还没有这一特殊步骤来去除质粒的。...

V1160柱子不会吸附乙肝病毒，但是要100%去除乙肝病毒特别是HBV的核酸，确实没有把握，可以用DNase去除核酸片段，不会去除病毒颗粒。