1）使用本试剂盒前，请仔细阅读说明书并遵守操作流程； 

2）本品提供瓶装版和预装版，可根据需求下单；

3）如有疑问，欢迎致电400-115-2855。

问题1：磁珠残留

原因1：磁珠残留。提取完成后取出样本12000rpm 离心3min。

问题2：纯化低

原因1：裂解充分。样本量适中，裂解时间与混合时间充分。

原因2：洗涤残留盐类和蛋白。增加最后一步洗涤溶液次数，再洗涤过程中可以增加洗涤震荡力度与混合时间。

原因3:乙醇挥发不彻底。磁珠在晾干过程中保证充分晾干，建议增加晾干时间。

问题3：得率低

原因1：裂解不充分。在裂解过程中，Buffer B1的使用量不准确，建议使用对应量进行裂解，同时保证裂解时间与充分混匀。

原因2：Buffer B1析出，导致裂解能力降低。Buffer B1溶液温度低于15℃时，会有晶体析出，使用前需要放置37℃水浴锅加热溶解，呈现澄清透亮状态方可使用。

原因3:裂解时间过短，裂解不充分。加入裂解液后，需要一定的时间进行裂解，一般时间控制再5min以内，当样本从浑浊样变成澄清，说明裂解完全。

原因4：培养过程质粒丢失。甘油菌菌种保存过程中存在质粒丢失现象，建议培养细菌前先划线或涂布平板活化菌种，以稳定产量。

原因5：培养时间过长，抗生素失效。细菌的培养时间不要超过16 h，发生溶菌将降低质粒质量，最好控制在13 - 15 h

原因6：宿主菌株差异性。不同宿主对质粒产量也会产生影响。建议使用end A-大肠杆菌菌株，如DH5α、TOP10及XL10等。

原因7：洗脱液使用不恰当。建议使用试剂盒中的Elution Buffer ，若用ddH2O或其它洗脱液，确认洗脱液pH值在7.5 - 8.5之间。

原因8：样本拷贝数低。不同质粒载体因拷贝数差异会造成产量有明显的波动。对于低拷贝质粒应加大菌液使用量，同时按照比例增加Buffer P1、Buffer P2和Buffer N3的用量。洗脱液应65℃预热，以增加洗脱效率。低拷贝质粒例如：pET系列，pWE15，SuperCos，pBR322，pACYC及其衍生载体，pSC101及其衍生载体等。

MPD2001中文