石蜡包埋组织基因组DNA提取试剂盒(磁珠法)(MGD2212)

FFPE gDNA Isolation Kit (Beads)

货号 规格 目录价
BW-MGD2212-A00-00 50 T 980.00
BW-MGD2212-A00-01 250 T 4165.00
BW-MGD2212-A00-02 1000 T

16660.00

BW-MGD2212-A32-10 1×32 705.00
BW-MGD2212-A32-11 10×32 6843.80
BW-MGD2212-A32-12 20×32 13437.50
BW-MGD2212-A96-10 1×96 2109.40
BW-MGD2212-A96-11 4×96 8125.00
BW-MGD2212-A96-12 10×96 18750.00

 

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本试剂盒用于从福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织样本中提取基因组DNA。
本试剂盒采用特制的无毒脱蜡试剂替代传统方法中的二甲苯,使脱蜡变得安全、简便。特制的缓冲液和给定的溶解条件,克服了石蜡包埋组织因福尔马林固定而引起的核酸交联问题,从而可高效地从组织切片中释放DNA。
由于组织固定和包埋会带来明显的碎片化问题,从而使得从FFPE样品中提取的DNA具有广泛的尺寸分布,故不推荐用于需要全长DNA片段的下游应用。
本试剂盒纯化所得基因组DNA适用于实时定量RT-PCR、测序和突变筛选等下游应用。支持手动提取和适用于自动化仪器和平台的应用。
产品特点:
1)安全无毒:特制脱蜡试剂,无二甲苯;
2)两套方案:
      快速法:无需蛋白酶K消化;
      标准法:品质更佳,纯度更高,超强稳定性。
备案凭证:
该产品已获医疗器械一类备案证:浙杭械备20200107号

1)使用本试剂盒前,请仔细阅读说明书并遵守操作流程;
2)保存条件:L Solution、FFPE Beads和蛋白酶K储存于4℃,其它组分储存于室温(15-25℃);
3)本品提供瓶装版和预装版,可根据需求下单;
4)如有疑问,欢迎致电400-115-2855。

问题1:磁珠残留

原因1:手动提取时候吸磁珠步骤时间短或者仪器程序设置错误或者仪器与预装板不适配导致磁珠残留在洗脱液中,建议增加吸磁珠时间,或者将最后样本洗脱液进行12000rpm离心3min。

问题2:纯度低

原因1:样本裂解不充分

样本与Proteinase K混合不从分,导致孵育处理样本裂解不完全,或者与Buffer BL混合不充分导致裂解不充分,建议充分混匀。

原因2:盐类及蛋白污染

省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次,或者洗涤时候程序设置力度太小,导致洗涤不充分,按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次并且程序设置按照说明书设置,尽量去除残留的离子。

原因3:乙醇残留

磁珠晾干过程太短,建议增加晾干时间室温晾干5min,机体晾干可以设置到90s。

原因4:污染

样品提取过程中提取到RNA:在90℃去交联后,待样品恢复至室温时,加入2μl RNase A (100mg/ml)至样品中,室温孵育2min。

原因5:脱蜡不充分

建议处理样本时,刮去多余的石蜡。增加脱蜡液用量或者进行二次脱蜡,以彻底去除石蜡。

问题3:得率低

原因1:样本量太少

提取样本量太少,建议增加样本量。

原因2:裂解不充分

样本量过多,导致裂解不充分;

Proteinase K常温放置导致酶活力失活,建议放置在-20℃保存;

Proteinase K与加入到样本孵育温度过高,建议按照说明书操作,孵育温度为55℃。

原因3:洗脱不完全

洗脱液温度低,建议按照说明书操作提取放置55℃加热;

洗脱不完全,磁珠与样本混合不充分,导致磁珠未能完全结合基因组;

洗脱液体积少:洗脱温度设置太高,导致洗脱体积减少或者手动提取时候加入的洗脱液太少,导致洗脱得率低,建议按照说明书30-50ul洗脱。

原因4:混合不充分

手提过程中或者机体过程中混合不充分导致磁珠结合不完全。

原因5:脱蜡不充分

处理样本时,刮去多余的石蜡。增加脱蜡液用量或者进行二次脱蜡,以彻底去除石蜡