BW-MGD2311（英）.pdf

BW-MGD2311血液基因组DNA提取试剂盒磁珠法说明书ver2209

1）使用本试剂盒前，请仔细阅读说明书并遵守操作流程；
2）保存条件：磁珠悬液、蛋白酶K溶液应贮存在2-8℃，其它组分储存于室温（15-25℃）；
3）使用前请检查Buffer是否有沉淀，若有沉淀产生，请于37℃加热溶解；
4）本品提供瓶装版和预装版，可根据需求下单；
5）如有疑问，欢迎致电400-115-2855。

问题1：磁珠残留

原因1:手动提取时候吸磁珠步骤时间短或者仪器程序设置错误或者仪器与预装板不适配导致磁珠残留在洗脱液中，建议增加吸磁珠时间，或者将最后样本洗脱液进行12000rpm离心3min。

问题2：纯度低

原因1:样本裂解不充分

样本与Proteinase K混合不从分，导致孵育处理样本裂解不完全，或者与Buffer BL混合不充分导致裂解不充分，建议充分混匀。

原因2：盐类及蛋白污染

省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次，或者洗涤时候程序设置力度太小，导致洗涤不充分，按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次并且程序设置按照说明书设置，尽量去除残留的离子。

原因3:乙醇残留

磁珠晾干过程太短，建议增加晾干时间室温晾干5min，机体晾干可以设置到90s。

原因4：血液样本中存在杂质

吸取样本时候如看到明显颗粒状杂质，建议去除，以免影响提取效果。

问题3：得率低

原因1：样本量太少

提取样本量太少，建议增加样本量，或者提取全血样本浓度太稀，建议可以增加样本量。

原因2：裂解不充分

样本量过多，导致裂解不充分；

Proteinase K常温放置导致酶活力失活，建议放置在-20℃保存；

Proteinase K与加入到样本孵育温度过高，建议按照说明书操作，孵育温度为55℃。

孵育时间太短，一般建孵育时间15-20min，如样本太浓稠，可以适当增加孵育时间，手提过程中，孵育过程中可以拿出来震荡2-3次

原因3：洗脱不完全

洗脱液温度低，建议按照说明书操作提取放置55℃加热；

洗脱不完全，磁珠与样本混合不充分，导致磁珠未能完全结合基因组；

洗脱液体积少：洗脱温度设置太高，导致洗脱体积减少或者手动提取时候加入的洗脱液太少，导致洗脱得率低，建议按照说明书50-100ul洗脱。

原因4：混合不充分

手提过程中或者机体过程中混合不充分导致磁珠结合不完全。