总RNA制备服务

服务项目 材料要求   RNA  周期(工作日) 服务价格
细菌总RNA提取 3mL对数生长期的新鲜菌液  ≈10ug 160元/样品
细胞总RNA提取 1×10^6悬浮培养或新鲜收集的细胞 ≈1ug 160元/样品
血液总RNA提取 1mL新鲜或液氮冻存的样本  ≈1ug 200元/样品
动物组织总RNA提取 100 mg新鲜或液氮冻存的样本 ≈100ug 220元/样品
植物组织总RNA提取 100 mg新鲜或液氮冻存的样本  ≈10ug 260元/样品
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倍沃拥有专业的技术人员,和自主研发、洁净车间生产的专利试剂盒,为您提供最可靠的服务。

由于RNA样品易受环境因素特别是RNA酶的影响而降解,提取高质量的RNA样品在生命科研中具有相当的挑战性。RNA提取对样品的新鲜性要求非常高,获取样品后最好立即提取RNA,若无条件立即实验,应于-80℃或液氮中保存样品,提取时取出样品后立即在低温下研磨裂解细胞,以防RNA降解。

目前普遍使用的RNA提取法有两种:基于异硫氰酸胍/苯酚混合试剂的液相提取法(即Biozol类试剂)和基于硅胶膜特异性吸附的离心柱提取法。

1、异硫氰酸胍/苯酚混合试剂的液相提取法

试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时不需要在低温下操作,及时在操作过程中释放的内源RNase,也会被TRIZOL中的强变性剂所抑制。当加入氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。Biomiga提供的Biozol溶液即基本基于这一原理。

2、硅胶膜特异性吸附的离心柱提取法

采用一系列裂解液裂解组织、细胞,抑制RNA酶,释放RNA,调节结合条件之后,硅胶膜特异性吸附RNA,多次漂洗去除DNA、蛋白质及其他杂质,最后经低盐溶液洗脱得到RNA。

溶液的主要成分为胍盐,对于某些次生物质含量丰富的多糖多酚类植物组织,比如棉花和葡萄叶子,Biomiga在常规胍盐的基础上进行了改进,添加了一些对多糖多酚类物质结合力很强的成分,像Plantaid可以高效结合多糖多酚,然后在离心的过程中去除。

具体问题欢迎与我们技术人员联系400-115-2855。