通用型粪便/土壤RNA小提试剂盒(R6911)

Stool/Soil RNA Mini Plus Kit

货号 规格 目录价
BW-R6911-01 50 T 3020.00
BW-R6911-02 250 T 14600.00
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Stool/Soil RNA Mini Kit 采用硅胶柱纯化技术,适合于从多种土壤样品中提取高效的总RNA,包括细菌RNA,真菌RNA,以及小型生物的总RNA。试剂盒采用高效的腐殖酸吸附,可高效去除土壤中腐殖酸等杂质。得到的RNA可直接用于RT-PCR等实验。本产品使用PureFilter gDNA Clean Columns除去土壤中大部分DNA,适合于从0.5g土壤样品中提取高达5 µg的总RNA, RNA产量取决于土壤类型。

问题1:得率低

原因1:样本中RNA已经降解,建议采集样品后快速液氮冷冻并储存于-70℃,防止样本中RNA降解,或者使用新鲜的样本。软体组织最好使用新鲜样本。

原因2:样本不新鲜或者样本过量导致裂解不充分,建议减少处理样本的加入量。特别是软体组织样本。

原因3:RNA wash Buffer 中未加入等比例乙醇,建议按照试剂盒说明书要求加入等比例的无水乙醇。

原因4:样本预处理不充分,建议请充分破碎样本

问题2:纯度差

原因1:蛋白质污染,建议可增加BufferRB再一次洗涤     

原因2:盐类污染,建议增加 RNA wash Buffer 洗涤次数;如后端提取RNA有盐类污染,可加入2.5倍体积的乙醇和0.1M的NaCl(终浓度)来沉降RNA,-20℃孵育30min,4℃,10,000×g离心15min,用DEPCtreatedddH2O重悬RNA沉淀。

问题3:基因组污染

原因1:RT-PCR加入过量RNA,建议减少RT-PCR反应时,RNA加入过量,RNA加入量应控制在50-100ng。

原因2:样本富含DNA。减少样品初始使用量。

问题3:柱子堵塞

原因1:样本量太多或者离心力不够,建议样本请使用震荡器震荡混匀;离心过程中可以增加离心时间,但离心转速不变;减少起始样本量。

原因2:样本预处理不充分,建议样本使用前请先预处理样本,研磨破碎充分,如样本太浓稠,建议稀释样本避免样本太粘稠,裂解不充分以及堵塞柱子。