软体动物RNA小量提取试剂盒(R6619)

Mollusks RNA Miniprep Kit

货号	规格	目录价
R6619-01	50 T	1142.00
R6619-02	250 T	4855.00

分类：

BEIWO产品系列生物试剂 RNA提取系列土壤/软体动物/粪便RNA提取

描述

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常见问题

软体动物RNA小量试剂盒是为有效回收软体动物、蛔虫、扁虫和其他富含粘多糖的无脊椎动物组织样本中大于200 nt的总RNA而设计的。
产品原理： 该方法依赖于阳离子洗涤剂，十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)的良好性能，以及硅膜的选择性RNA结合。样品在含有CTAB的高盐缓冲液中被均质化和溶解，用氯仿提取以去除粘多糖和变性蛋白。
通过快速的醇沉步骤，调整结合条件，使用RNA Column进一步纯化RNA。通过这种方式，盐、蛋白质和其他污染物被去除，从而产生高质量的总RNA.
下游应用： 逆转录、poly A+ mRNA选择和杂交技术等

R6619.pdf

问题1：得率低

原因1：样本中RNA已经降解，建议采集样品后快速液氮冷冻并储存于-70℃，防止样本中RNA降解，或者使用新鲜的样本。软体组织最好使用新鲜样本。

原因2：样本不新鲜或者样本过量导致裂解不充分，建议减少处理样本的加入量。特别是软体组织样本。

原因3：RNA wash Buffer 中未加入等比例乙醇，建议按照试剂盒说明书要求加入等比例的无水乙醇。

原因4：样本预处理不充分，建议请充分破碎样本

问题2：纯度差

原因1：蛋白质污染，建议可增加BufferRB再一次洗涤

原因2：盐类污染，建议增加 RNA wash Buffer 洗涤次数；如后端提取RNA有盐类污染，可加入2.5倍体积的乙醇和0.1M的NaCl（终浓度）来沉降RNA，-20℃孵育30min，4℃，10,000×g离心15min，用DEPCtreatedddH2O重悬RNA沉淀。

问题3：基因组污染

原因1：RT-PCR加入过量RNA，建议减少RT-PCR反应时，RNA加入过量，RNA加入量应控制在50-100ng。

原因2：样本富含DNA。减少样品初始使用量。