真菌基因组DNA提取试剂盒(GD2416)
Fungal gDNA Isolation Kit
| 货号 | 规格 | 目录价 |
| BW-GD2416-01 | 50 T | 560.00 |
| BW-GD2416-02 | 250 T | 2382.00 |
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描述
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常见问题
本试剂盒适用于从100 mg新鲜或50 mg干燥或冷冻的真菌中纯化基因组DNA。 利用硅胶膜特异吸附核酸原理，快速纯化得到基因组DNA，整个操作过程无需酚/氯仿抽提，使用安全可靠，并能够最大限度去除杂质蛋白、多糖、各种有机物、酶抑制剂等。所得DNA可直接用于各种常规操作，包括PCR、酶切、Southern杂交等。
产品特点：
1）操作简单：短时间内完成基因组DNA的分离纯化；
2）安全可靠：无需酚/氯仿抽提；
3）纯度高：最大限度去除污染物和抑制剂，便于下游应用。
问题1：柱子柱塞
原因1：柱子离心力太小，建议水平转子4000rpm离心2min或者角转子8000rpm离心1min
原因2：组织样本中有明显的有杂质污染。溶液中存在明显的颗粒物质，可于10,000rpm离心3 min去除未消化的物质。
问题2：纯度低
原因1:样本裂解不充分
样本与Proteinase K混合不从分，导致孵育处理样本裂解不完全，或者与Buffer BL混合不充分导致裂解不充分，建议加入时震荡2min；
原因2：盐类及蛋白污染
盐类污染，省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次，尽量去除残留的离子；
蛋白污染，样本量过多，未增加Buffer KB洗涤量，如增加样本量或者样本杂志过多，建议在原说明书步骤中再增加一次Buffer KB洗涤。
原因3:乙醇残留
没有进行空管离心操作，或者空离的离心力太小，建议如离心力太小可以增加离心时间或者使用50℃烘箱烘干2min。请按照说明书进行空管离心操作。
问题3：得率低
原因1：样本量太少
提取样本量太少，建议增加样本量。
原因2：裂解不充分
样本量过多，导致裂解不充分；
Proteinase K常温放置导致酶活力失活，建议放置在-20℃保存；
Proteinase K与加入到样本孵育温度过高，建议按照说明书操作，孵育温度为55℃。
原因3：洗脱不完全
洗脱液温度低，建议按照说明书操作提取放置55℃水浴锅加热；
洗脱不完全，建议可以进行二次洗脱，就是第一次洗脱完后，再将洗脱下来的样本再加入到柱子里面进行二次洗脱；
洗脱液体积少：洗脱液体积小导致润柱子不完全，导致洗脱得率低，建议按照说明书50-100ul洗脱。
