酵母基因组DNA小量提取试剂盒(GD2415)

Yeast gDNA Isolation Kit

货号 规格 目录价
BW-GD2415-01 50 T 560.00
BW-GD2415-02 250 T 2382.00
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本试剂盒用于从各种酵母细胞中纯化基因组DNA,其利用膜吸附原理和独特的缓冲液系统,溶壁酶,玻璃珠破壁,纯化基因组。所得基因组DNA可直接用于PCR、酶切、Southern杂交等分子实验。
产品特点:
1)重复性好,产量高:处理3 mL样品可得2-30 µg高纯度DNA;
2)安全可靠:整个提取过程无需酚氯仿抽提;
3)纯度高:纯化产物可直接用于PCR、酶切、杂交等分子实验。
1)使用本试剂盒前,请仔细阅读说明书并遵守操作流程;
2)保存条件:Proteinase K可于室温(15-25℃)稳定储存一年。长期储存,建议分装Proteinase K和Lysozyme并储存于-20℃;其他试剂及用品可保存于室温(15-25℃);
3)如有疑问,欢迎致电400-115-2855。

问题1:柱子柱塞

原因1:柱子离心力太小,建议水平转子4000rpm离心2min或者角转子8000rpm离心1min

原因2:组织样本中有明显的有杂质污染。溶液中存在明显的颗粒物质,可于10,000rpm离心3 min去除未消化的物质。

 

问题2:纯度低

原因1:样本裂解不充分

样本与Proteinase K混合不从分,导致孵育处理样本裂解不完全,或者与Buffer BL混合不充分导致裂解不充分,建议加入时震荡2min;

原因2:盐类及蛋白污染

盐类污染,省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次,尽量去除残留的离子;

蛋白污染,样本量过多,未增加Buffer KB洗涤量,如增加样本量或者样本杂志过多,建议在原说明书步骤中再增加一次Buffer KB洗涤。

原因3:乙醇残留

没有进行空管离心操作,或者空离的离心力太小,建议如离心力太小可以增加离心时间或者使用50℃烘箱烘干2min。请按照说明书进行空管离心操作。

 

问题3:得率低

原因1:样本量太少

提取样本量太少,建议增加样本量。

原因2:裂解不充分

样本量过多,导致裂解不充分;

Proteinase K常温放置导致酶活力失活,建议放置在-20℃保存;

Proteinase K与加入到样本孵育温度过高,建议按照说明书操作,孵育温度为55℃。

原因3:洗脱不完全

洗脱液温度低,建议按照说明书操作提取放置55℃水浴锅加热;

洗脱不完全,建议可以进行二次洗脱,就是第一次洗脱完后,再将洗脱下来的样本再加入到柱子里面进行二次洗脱;

洗脱液体积少:洗脱液体积小导致润柱子不完全,导致洗脱得率低,建议按照说明书50-100ul洗脱。