昆虫基因组DNA提取试剂盒(GD2413)

Insect gDNA Isolation Kit

货号 规格 目录价
BW-GD2413-01 50 T 560.00
BW-GD2413-02 250 T 2382.00
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本试剂盒用从各种昆虫(不超过50 mg)及其它无脊椎动物组织(不超过30 mg)中提取基因组DNA。提取到的基因组DNA可用于限制性酶切、PCR扩增、Southern杂交等分子实验。
产品原理:
组织经匀浆后,加入一种特殊的溶液进行裂解,再通过氯仿抽提,去除蛋白质和多糖,加入DNA柱中,高盐环境下DNA吸附于膜上,经漂洗去除杂质,最后用低盐溶液将DNA洗脱下来。
产品特点:
1)适应性广:可从各种昆虫、节肢动物组织中(也适用于用酒精或DNE保存的组织)纯化基因组DNA;
2)操作快速简单:裂解后20分钟内完成基因组DNA的提取;
3)高纯度:提取到的基因组DNA可直接用于下游分子实验,如PCR扩增,杂交等。
1)使用本试剂盒前,请仔细阅读说明书并遵守操作流程;
2)保存条件:Proteinase K可于室温(15-25℃)稳定储存一年。长期储存,建议分装Proteinase K和Lysozyme并储存于-20℃;其他试剂及用品可保存于室温(15-25℃);
3)如有疑问,欢迎致电400-115-2855。

问题1:柱子柱塞

原因1:柱子离心力太小,建议水平转子4000rpm离心2min或者角转子8000rpm离心1min

原因2:组织样本中有明显的有杂质污染。溶液中存在明显的颗粒物质,可于10,000rpm离心3 min去除未消化的物质。

 

问题2:纯度低

原因1:样本裂解不充分

样本与Proteinase K混合不从分,导致孵育处理样本裂解不完全,或者与Buffer BL混合不充分导致裂解不充分,建议加入时震荡2min;

原因2:盐类及蛋白污染

盐类污染,省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次,尽量去除残留的离子;

蛋白污染,样本量过多,未增加Buffer KB洗涤量,如增加样本量或者样本杂志过多,建议在原说明书步骤中再增加一次Buffer KB洗涤。

原因3:乙醇残留

没有进行空管离心操作,或者空离的离心力太小,建议如离心力太小可以增加离心时间或者使用50℃烘箱烘干2min。请按照说明书进行空管离心操作。

 

问题3:得率低

原因1:样本量太少

提取样本量太少,建议增加样本量。

原因2:裂解不充分

样本量过多,导致裂解不充分;

Proteinase K常温放置导致酶活力失活,建议放置在-20℃保存;

Proteinase K与加入到样本孵育温度过高,建议按照说明书操作,孵育温度为55℃。

原因3:洗脱不完全

洗脱液温度低,建议按照说明书操作提取放置55℃水浴锅加热;

洗脱不完全,建议可以进行二次洗脱,就是第一次洗脱完后,再将洗脱下来的样本再加入到柱子里面进行二次洗脱;

洗脱液体积少:洗脱液体积小导致润柱子不完全,导致洗脱得率低,建议按照说明书50-100ul洗脱。