全血基因组DNA小量/中量提取试剂盒(GD2313)
Whole Blood gDNA Mini/Midiprep Kit
| 货号 | 规格 | 目录价 |
| GD2313-01 | 10 T | 250.00 |
| GD2313-02 | 25 T | 625.00 |
问题1：柱子柱塞
原因1：柱子离心力太小，建议水平转子4000rpm离心2min或者角转子8000rpm离心1min
原因2：组织样本中有明显的有杂质污染：溶液中存在明显的颗粒物质，建议吸取血液样本时候不要吸取明显的颗粒杂质
原因3：血液样本太浓稠，导致加入柱子量太多导致堵住情况，建议稀释样本进行处理。
原因4:样本量过多：处理样本量过多，请按照说明书操作，不要操作最大提取量。
问题2：纯度低
原因1:样本裂解不充分
样本与Proteinase K混合不从分，导致孵育处理样本裂解不完全，或者与裂解缓冲液混合不充分导致裂解不充分，建议加入时震荡2min；
样本量过多，如增加样本量请等比例增加Proteinase K以及Buffer BL用量，机体样本上样量体积不可以超过250ul；
样本太浓稠，导致样本很难被Proteinase K破壁裂解。
原因2：盐类及蛋白污染
盐类污染，省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次，尽量去除残留的离子；
蛋白污染，样本量过多，未增加Buffer KB洗涤量，如增加样本量或者样本杂志过多，建议在原说明书步骤中再增加一次Buffer KB洗涤。
原因3:乙醇残留
没有进行空管离心操作，或者空离的离心力太小，建议如离心力太小可以增加离心时间或者使用50℃烘箱烘干2min。请按照说明书进行空管离心操作。
原因4：洗脱时离心转速太大
柱子上的膜可能由于离心速度太大存在于洗脱液中，避免转速高于15,000 ×g，不会干扰PCR或限制酶消化。
原因5：血红蛋白留在柱子上
样品上柱后，用2 mL Buffer BL洗涤一次。
问题3：得率低
原因1：样本量太少
提取样本量太少，建议增加样本量。
原因2：裂解不充分
样本量过多，导致裂解不充分；
Proteinase K常温放置导致酶活力失活，建议放置在-20℃保存；
Proteinase K与加入到样本孵育温度过高，建议按照说明书操作，孵育温度为55℃。
原因3：洗脱不完全
洗脱液温度低，建议按照说明书操作提取放置55℃水浴锅加热；
洗脱不完全，建议可以进行二次洗脱，就是第一次洗脱完后，再将洗脱下来的样本再加入到柱子里面进行二次洗脱；
洗脱液体积少：洗脱液体积小导致润柱子不完全，导致洗脱得率低，建议按照说明书50-100ul洗脱。
原因4：加入Buffer BL后没有加入无水乙醇。加入Buffer BL后按照说明书加入对应的无水乙醇或者异丙醇。
原因5：DNA Wash Buffer内没有加入无水乙醇。DNA Wash Buffer为母液，需要按照瓶装对应加入等量的无水乙醇。
问题1：柱子柱塞
原因1：柱子离心力太小，建议水平转子4000rpm离心2min或者角转子8000rpm离心1min
原因2：组织样本中有明显的有杂质污染：溶液中存在明显的颗粒物质，建议吸取血液样本时候不要吸取明显的颗粒杂质
原因3：血液样本太浓稠，导致加入柱子量太多导致堵住情况，建议稀释样本进行处理。
原因4:样本量过多：处理样本量过多，请按照说明书操作，不要操作最大提取量。
问题2：纯度低
原因1:样本裂解不充分
样本与Proteinase K混合不从分，导致孵育处理样本裂解不完全，或者与裂解缓冲液混合不充分导致裂解不充分，建议加入时震荡2min；
样本量过多，如增加样本量请等比例增加Proteinase K以及Buffer BL用量，机体样本上样量体积不可以超过250ul；
样本太浓稠，导致样本很难被Proteinase K破壁裂解。
原因2：盐类及蛋白污染
盐类污染，省略了DNA wash Buffer 洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用DNA wash Buffer洗涤两次，尽量去除残留的离子；
蛋白污染，样本量过多，未增加Buffer KB洗涤量，如增加样本量或者样本杂志过多，建议在原说明书步骤中再增加一次Buffer KB洗涤。
原因3:乙醇残留
没有进行空管离心操作，或者空离的离心力太小，建议如离心力太小可以增加离心时间或者使用50℃烘箱烘干2min。请按照说明书进行空管离心操作。
原因4：洗脱时离心转速太大
柱子上的膜可能由于离心速度太大存在于洗脱液中，避免转速高于15,000 ×g，不会干扰PCR或限制酶消化。
原因5：血红蛋白留在柱子上
样品上柱后，用2 mL Buffer BL洗涤一次。
问题3：得率低
原因1：样本量太少
提取样本量太少，建议增加样本量。
原因2：裂解不充分
样本量过多，导致裂解不充分；
Proteinase K常温放置导致酶活力失活，建议放置在-20℃保存；
Proteinase K与加入到样本孵育温度过高，建议按照说明书操作，孵育温度为55℃。
原因3：洗脱不完全
洗脱液温度低，建议按照说明书操作提取放置55℃水浴锅加热；
洗脱不完全，建议可以进行二次洗脱，就是第一次洗脱完后，再将洗脱下来的样本再加入到柱子里面进行二次洗脱；
洗脱液体积少：洗脱液体积小导致润柱子不完全，导致洗脱得率低，建议按照说明书50-100ul洗脱。
原因4：加入Buffer BL后没有加入无水乙醇。加入Buffer BL后按照说明书加入对应的无水乙醇或者异丙醇。
原因5：DNA Wash Buffer内没有加入无水乙醇。DNA Wash Buffer为母液，需要按照瓶装对应加入等量的无水乙醇。
