无内毒素快速质粒小提试剂盒I(PD1220)
EZgene™ EndoFree Plasmid ezFlow Miniprep Kit I
| 货号 | 规格 | 目录价 |
| BW-PD1220-01 | 50 T | 432.00 |
| BW-PD1220-02 | 250 T | 1831.00 |
分享
描述
资料下载
Q&A
注意事项
Buffer RET为本公司自主研发的一种可以高效去除内毒素的无色溶液。在质粒提取过程中，菌体经裂解中和，取上清后，加入该溶液，通过离心柱吸附后，既可去除内毒素。之后进行常规的洗涤、洗脱操作。处理1～5 mL的菌液，可获得至多50 µg的质粒DNA。内毒素含量1-10 EU/ µg DNA，可直接用于转染各种内毒素敏感型细胞系，原代细胞。
产品特点:
1）高纯度：提取的质粒DNA可直接用于下游高要求实验；
2）内毒素含量低：1-10 EU/µg质粒DNA；
3）快捷省时：与经典方法相比，无需冰浴和离心分层步骤，操作更快速简便；
4）快速：30分钟内完成所有提取步骤。
| 问题 | 可能原因 | 建议 |
| 得率低 | 裂解不完全 |
加入Buffer B1后充分混匀 |
| 如果瓶盖没拧紧，重配Buffer B1( 0.2 M NaOH和1% SDS) | ||
| 菌液过度培养或不新鲜 | 菌液培养12-16 h为佳，若当天来不及纯化，将菌液离心后收集菌体保存于-20℃。请勿将菌液置于 4℃过夜 | |
| 质粒拷贝数低 | 增加培养基和Buffer A1,B1,N1的体积 | |
| 没有DNA | 质粒在宿主菌内丢失 | 准备新鲜的菌液 |
| 基因组污染 | 加入Buffer B1后超过5 min | 加入Buffer B1后不要剧烈震荡，孵育时间不要超过5 min |
| RNA污染 | RNase A 没有加入至Buffer A1 | 在Buffer A1 中加入RNase A |
| 质粒跑出点样孔 | 乙醇没去干净 | 洗脱前确保没有乙醇残留. 如果必要的话，可再次离心 |
1）使用本试剂盒前，请仔细阅读说明书并遵守操作流程；
2）保存条件：RNase A储存于室温（15-25℃），Buffer A1加入RNase A 后储存于4℃，其它组分储存于室温（15~25℃）；
3）如有疑问，欢迎致电400-115-2855。
