高纯度无内毒素质粒大量提取试剂盒(沉淀法)(PD1516)
EZgene™ High Pure EndoFree Plasmid Maxiprep Kit(Precipitation)
货号 | 规格 | 目录价 |
PD1516-01 | 10 T | 635.00 |
PD1516-02 | 25 T | 1348.00 |
该试剂盒可以用来从 100 mL 以上的大肠杆菌菌液中快速,高效地提取质粒DNA。方法简单,无需过柱,不用酚氯仿抽提;质粒损失率少,质粒损伤小,质粒提取量在 1 mg 以上,最高可以达到 5 mg。菌液使用量灵活,高拷贝质粒可使用 100 mL 菌液,中低拷贝质粒可使用更多的菌液。纯化过程约需 1~1.5 小时。
1)使用本试剂盒前,请仔细阅读说明书并遵守操作流程;
问题1:内毒素高
原因1:加入 Buffer C1时候未中和完全。加入后要充分混匀,内部无明显的局部阴影,并且过滤离心的上清无蛋白沉淀残留。
原因2:样本量过多。处理过量菌液,应该按照比例增加Buffer RET的用量。
原因3:Buffer RET未充分混匀。加入Buffer RET 后应充分混匀,可增加上下颠倒次数至15次。
问题2:Endoclean Buffer 过于粘稠不好取样
原因1:为去除内毒素效果较好,再吸取该溶液时请轻轻使用移液枪进行吸取溶液,当溶液充满整个枪头时候再取出枪头。
问题3:离心后不能将Endoclean Buffer与上清液分离
原因1:离心温度不可低于23℃,离心时候请设置离心机稳定。
问题4:内毒素含量超标
原因1:上清中残留Endoclean Buffer。在萃取完后,吸取上清时候请勿吸取Endoclean Buffer。
原因2:Endoclean Buffer与上清液未充分混合。请充分混合,混合完成后混合液呈现出粉色浑浊状态。
原因3:Endoclean Buffer冰浴时间过短。建议放置冰中孵育10min以上。